皮肤变态反应试验是一种通过重复接触某种物质后机体产生的免疫传递的皮肤反应。在人类中,这种反应可能表现为瘙痒、红斑、丘疹、水疱等症状;而在动物身上,可能只表现为皮肤红斑和水肿。
皮肤变态反应试验的主要目的是确定化妆品原料或产品是否会引起皮肤变态反应及其程度。它是化妆品安全性毒理学试验的重要组成部分,适用于化妆品和新原料的研究及安全评估。
皮肤变态反应试验方法及基本流程
皮肤变态反应试验的主要方法包括皮肤斑贴试验、划破试验、皮内试验和体外皮肤变态反应试验。这些试验方法各有特点,适用于不同类型的变态反应检测,确保了试验的准确性和有效性。
(1)皮肤斑贴试验:
受试部位通常选择上背部脊柱两侧的正常皮肤。如果皮脂过多,可以用75%乙醇轻轻擦拭,然后用生理盐水清洗待干。
将变应原按顺序置于惰性聚乙烯塑料或铝制斑试器内,贴敷在受试部位,并用手掌轻压以排出空气。
观察结果,通常在48小时后去除斑贴,等待30分钟后观察第一次结果,72小时后再次观察结果,必要时可在1周后进行第三次观察。
(2)划破试验:
选择前臂屈侧为受试部位,局部清洁消毒。
用消毒的种痘刀或针尖划数条长0.3~0.5厘米的划痕,滴生理盐水1滴,然后将受试物涂于划痕上,留一划痕仅滴生理盐水作阴性对照。
20分钟后用消毒蒸馏水洗净划痕,观察反应变化。
(3)皮内试验:
选择前臂屈侧为受试部位,局部清洁消毒。
将欲试抗原以无菌生理盐水适当稀释,分别吸取0.1毫升注射于受试部位皮内。同时注射多种抗原时,应在注射部位做标记。
观察结果,通常在注射后观察局部反应。
(4)体外皮肤变态反应人细胞系活化试验(h-CLAT):
使用体外培养的人急性单核白血病细胞(THP-1细胞),与受试物共暴露24小时后,使用荧光抗体染料对细胞表面分子CD86、CD54染色并用流式细胞仪测定。
通过测定细胞表面标志物的改变来评估受试物是否具有致敏性。